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一种利用显微授精技术生产转基因兔的方法
- 专利权人:
- 广西大学
- 发明人:
- 陆凤花,石德顺,张顺,刘庆友,罗婵,李湘萍
- 申请号：
- CN201110093587.1
- 公开号：
- CN102242151A
- 申请日:
- 2011.04.14
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2011
- 代理人:
- 黄永校
- 摘要：
- 一种利用显微授精技术生产转基因兔的方法，通过假阴道法采集精液或从附睾收集的精液用PBS上游，经离心洗涤后，分装到冷冻管中，投入液氮中保存；进行显微操作之前，从液氮中取出装有精子的冷冻管，室温下解冻，加入外源DNA质粒与冻融的精子充分混匀，使DNA质粒的终浓度为30ng/ul，并置于4℃下孵育10分钟，使精子与DNA充分结合，然后，通过显微授精技术，将孵育了DNA的精子注入到兔卵母细胞胞质中，显微授精后的卵母细胞经过化学激活处理后，放入培养滴中培养2-4天。用本发明的方法，成功生产了转基因兔胚胎，胚胎阳性率达到59.65％，经胚胎移植获得母兔妊娠并产下活仔兔，仔兔经过细胞和分子生物学鉴定，证明4只表达有外源基因转基因兔，阳性率为57.14％。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
