本发明提供了一种结核病血清学诊断试剂盒,该试剂盒中至少包括包被液、洗涤液、封闭液和终止液,还包含以下组分:重组蛋白rRv0220,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;重组蛋白rRv2958c,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明所提供的两种重组蛋白均具有良好的免疫反应性,能与其诱导的小鼠产生的抗体发生特异结合。两种重组蛋白均能与结核病患者血清发生特异结合,经间接ELISA法检测,与胶体金法(38‑16KDa)比较,rRv0220的特异性、敏感性和总符合率分别为98.6%,98.3%和98.4%;rRv2985c的特异性、敏感性和总符合率分别为100%,96.5%和98.4%,说明两种重组蛋白具有高度的敏感性与特异性,能够作为结核病血清学诊断的优选抗原。