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UOX基因敲除小鼠模型及其构建方法
专利权人:
常州卡文斯实验动物有限公司
发明人:
黄晶,夏海林,张茹君
申请号:
CN201910757568.0
公开号:
CN112342249A
申请日:
2019.08.09
申请国别(地区):
CN
年份:
2021
代理人:
摘要:
本发明涉及一种基因敲除小鼠模型及其构建方法,属于动物模型及其应用领域。其方法流程包括sgRNA和Cas9 RNA的获得;UOX突变胚胎的获得及移植;基因敲除小鼠鉴定;纯合品系构建。方法步骤具体为UOX基因第三外显子前后两个位点设计双sgRNA,通过PCR、体外转录和纯化获得sgRNA和Cas9 mRNA。sgRNA和Cas9 mRNA显微注射至小鼠原核胚,体外培养至二细胞胚或桑椹胚阶段,胚胎移植至代孕母鼠。F0代小鼠出生后,提取其DNA进行电泳分析和测序分析。F0代交配繁殖至F2代获得UOX缺失的小鼠纯合品系。本发明构建模型的时间较短,模型变异性小,引起并发症可能性小,模型有效时间增加。并且小鼠模型饲养简单、操作方便、与人同属哺乳动物,生理生化特性与人接近。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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