本发明提供了一种重组杆状病毒及其构建方法和应用,所述重组病毒为核苷酸序列为SEQ ID No1.的基因通过转座重组整合到杆状病毒的基因组上获得的。本发明还提供了重组杆状病毒构建方法,包括从AcMNPV获得Ac‑pk2基因,将该基因构建到pFastBacDual‑egfp,通过Bac‑to‑Bac系统获得重组杆状病毒AcMNPV‑PK2‑EGFP。本发明重组杆状病毒可以通过营救翻译起始来帮助外源蛋白的表达,提高昆虫杆状病毒表达系统的蛋白产量,在杆状病毒昆虫表达系统作为真核表达系统的应用方面具有较好的应用前景。本发明的重组杆状病毒还可用于制备防治鳞翅目害虫的生物杀虫剂。