本发明提供了一种杀菌肽CAD的重组表达及制备方法,属于生物技术领域。本发明是将天蚕素杀菌肽CAD的基因与分子伴侣β-半乳糖苷酶Abg蛋白标签融合,合成编码Abg-杀菌肽CAD融合蛋白的融合基因;再用限制性内切酶对杀菌肽CAD融合基因进行双酶切,并与同样用限制性内切酶双酶切的表达载体pUC18质粒连接,构建一种表达毒性蛋白的表达载体转化至大肠杆菌E.coli ER 2566,获得基因工程菌;然后通过培养基因工程菌组成型表达获得融合蛋白Abg-CAD;最后通过Factor Xa蛋白酶酶切,纯化,获得杀菌肽CAD,其中可溶性目的蛋白占菌体总目的蛋白的90%以上,蛋白纯度达95%以上,为取代抗生素应用于医药、兽药、水产、饲料添加剂等产业奠定了基础。