本发明提供了一种检测猫传染性鼻气管炎病毒的试剂盒,含有特异性引物,其中上游引物的序列如SEQ ID NO:1所示,下游引物的序列如SEQ ID NO:2所示;特异性探针的序列如SEQ ID NO:3所示,特异性探针的荧光物质为FAM,淬灭物质为TAMRA。本发明还提供了采用上述的试剂盒检测猫传染性鼻气管炎病毒的方法。本发明的引物及探针针对猫传染性鼻气管病毒DNA的样品可发生特异性扩增,而对没有猫传染性鼻气管病毒DNA的样品不发生特异性扩增,因而所述引物和探针可良好地应用于检测猫传染性鼻气管病毒,并且具有良好的再现性、特异性好、灵敏度高、时间短。