一种应用于模式动物斑马鱼转基因的快速筛选方法
- 专利权人:
- 扬州大学
- 发明人:
- 崔恒宓,薛松磊,孙振,欧阳娟,徐慧,沈晖
- 申请号：
- CN201711157630.X
- 公开号：
- CN107881200A
- 申请日:
- 2017.11.20
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 卢亚丽
- 摘要：
- 本发明提供一种应用于模式动物斑马鱼转基因的快速筛选方法，包括以下步骤：1)构建含有强启动子、目的基因和标签基因的基因表达载体；2)设计出针对靶基因的特异性靶点，获得靶向SgRNA序列；3)在特异性靶点的基础上构建同源重组载体；4)将同源重组载体片段、SgRNA序列体外转录合成的mRNA，以及体外转录合成的nCas9‑mRNA，三者共同注射斑马鱼受精卵；5)先筛选出靶基因功能缺失的斑马鱼；再通过标签基因进行第二次筛选，获得标签基因表达个体，从而获得表达目的基因表达个体。该方法可以对早期斑马幼鱼进行筛选，达到快速建立转基因模型目的。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
