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PRODUCTION TECHNIQUE FOR RECOMBINANT HUMAN CRYPTOCHROME PROTEIN I (HCRY1) AND COMBINATION PRODUCT THEREOF
专利权人:
HUANG; Wenlin
发明人:
HUANG, Wenlin,黄文林
申请号:
CNCN2016/000641
公开号:
WO2017/205996A1
申请日:
2016.11.17
申请国别(地区):
WO
年份:
2017
代理人:
摘要:
A production technique for recombinant human cryptochrome protein I (hCRY1) and a combination product thereof. The production technique comprises the following steps: cloning a hCRY1 gene to a pET-28a to obtain a pET-28a-hCRY1 recombinant vector introducing the recombinant vector into an E. coli BL21(DE3) and screening to obtain a genetically engineered bacterium BL21-hCRY1-b culturing the BL21-hCRY1-b in a fermentation tank and inducing the expression of a recombinant protein collecting and rinsing an inclusion body denaturing and dissolving the inclusion body performing protein affinity chromatography for purification performing protein gradient dialysis and renaturation performing protein ultrafiltration concentration and solution replacement to obtain a recombinant hCRY1 protein. The production technique provides a hCRY1 yield of 200-300 mg/L, far higher than other currently known hCRY1 production methods.La présente invention concerne une technique de production destinée à une protéine cryptochrome humaine recombinante I (hCRY1) et son procédé de combinaison. La technique de production comprend les étapes suivantes : le clonage dun gène hCRY1 à pET-28a en vue dobtenir un vecteur recombinant pET-28a-hCRY1 lintroduction du vecteur recombinant dans BL21(DE3) dE. coli et le criblage en vue dobtenir une bactérie génétiquement modifiée BL21-hCRY1-b culture de BL21-hCRY1-b dans une cuve de fermentation et linduction de lexpression dune protéine recombinante le recueil et le rinçage dun corps dinclusion la dénaturation et la dissolution du corps dinclusion lexécution dune chromatographie daffinité des protéines pour la purification lexécution dune dialyse à gradient de protéine et la renaturation lexécution dune concentration par ultrafiltration des protéines et le remplacement de solution en vue dobtenir une protéine hCRY1 recombinante. La technique de production permet datteindre un rendement de hCRY1 de 200 à 300 mg/l, bien plus élevé que les autres procédés
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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