本发明公开了一种用于冬绿芥蓝杂交种子纯度鉴定的引物及方法,引物SSR引物为BOE353,所述BOE353的序列由SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2组成,所述SEQ ID NO:1序列为:BOE353‑F:5’‑CGTCGGCTCATCTGCTA‑3’;所述SEQ ID NO:2序列为:BOE353‑R:5’‑CCTCGCGACGCTTCTTCA‑3’,同时公开一种鉴定方法。本发明的方法可将‘冬绿芥蓝’杂交种子与其母本、父本种子区分开来,快速检测出杂交种子的纯度;具有快速、准确、低成本,操作简单等优点,能够替代传统杂交种子纯度鉴定的方法,具有较高的商业应用价值。