Provided herein are methods of producing engineered T cells expressing a recombinant receptor, eg, for use in cell therapy. In some aspects, the provided methods include incubating the cells under stimulating conditions, introducing the recombinant polypeptide into the cells via transduction or transfection, and/or accelerating proliferation and/or expansion of the cells. Culturing at least one step, wherein the at least one step is carried out in the presence of an agent that inhibits mammalian target (mTOR) activity of rapamycin. In some aspects, the culturing is performed in the presence of an agent that inhibits the mammalian target (mTOR) activity of rapamycin. In some aspects, the methods provided above produce genetically engineered T cells with improved persistence and/or anti-tumor activity in vivo.제공된 본원은 예컨대, 세포 치료에 사용하기 위한, 재조합 수용체를 발현하는 조작된 T 세포의 생산방법이다. 일부 측면에서, 상기 제공된 방법은 자극 조건 하에 세포를 인큐베이션하는 단계, 형질도입 또는 형질감염을 통해 재조합 폴리펩타이드를 상기 세포에 도입하는 단계, 및/또는 증식 및/또는 팽창을 촉진하는 조건 하에 세포를 배양하는 단계 하나 이상을 포함하고, 상기 하나 이상의 단계는 라파마이신의 포유류 표적(mTOR) 활성을 억제하는 작용제의 존재 하에 수행된다. 일부 측면에서, 배양은 라파마이신의 포유류 표적(mTOR) 활성을 억제하는 작용제의 존재 하에 수행된다. 일부 측면에서, 상기 제공된 방법은 in vivo 개선된 지속성 및/또는 항-종양 활성을 갖는 유전적으로 조작된 T 세포를 생산한다.
