本发明提供了一种鼠抗人ErbB2单克隆抗体10A6及其制备方法和应用,属于肿瘤免疫生物治疗技术领域,所述鼠抗人ErbB2单克隆抗体10A6的重链氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,轻链氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述的鼠抗人ErbB2单克隆抗体10A6的制备方法,包括以下步骤:1)以ErbB2‑Domain4基因编码的蛋白免疫小鼠;2)将所述免疫脾细胞与骨髓瘤细胞融合;3)培养杂交瘤细胞,收集细胞培养的上清液,纯化获得鼠抗人ErbB2单克隆抗体10A6。本发明中所述鼠抗人ErbB2单克隆抗体10A6效价高、特异性好,能够用于制备诊断或治疗ErbB2高表达恶性肿瘤的药物。