本发明提供了一种新城疫病毒伪型病毒的制备方法以及伪型病毒的用途,制备方法包括(1)携带F、HN基因的重组质粒的构建;(2)整合有新城疫病毒囊膜蛋白的伪型病毒NDV-PP的制备。其中,扩增F基因和HN基因的两对引物分别为F-sense与F-antisense、HN-sense与HN-antisense,引物序列分别为SEQ ID No.1与SEQ ID No.2、SEQ ID No.3与SEQ ID No.4。本发明拟建立一种敏感、快速、适合大批样本检测的新城疫病毒中和抗体检测方法,以期替代传统的中和抗体检测手段,为疫病的快速诊断、疫苗效果评价等提供有益工具。