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高活性β-内酰胺抗生素合成用酶的高通量筛选方法
- 专利权人:
- 华北制药河北华民药业有限责任公司
- 发明人:
- 刘力强,贾娟娟,牛昆,范俊辉,石晨光,王召业,吕娜,武芳,王欢,杨丽萍,邸胜苗,刘东
- 申请号:
- CN201310696643.X
- 公开号:
- CN103667418B
- 申请日:
- 2013.12.18
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 白海静
- 摘要:
- 本发明公开了一种β-内酰胺抗生素合成用酶的高通量筛选方法,它按以下步骤进行:在酶标板的板孔中加入合成液,然后加入待测酶样品,在微孔板振荡反应器中,10-30℃,反应0.1-3小时,反应过程中每隔1-30分钟取出酶标板加入PDAB显色液显色,酶标测定其在415nm处的吸光值大小;根据吸光值变化趋势及吸光值的最低值,筛选出活性高、合成能力好的酶;所述合成液是将β-内酰胺抗生素的母核与侧链溶解于KPB溶液中制成;所述待测酶样品为β-内酰胺抗生素合成酶。本发明可以用于用于内酰胺类抗生素如阿莫西林、头孢氨苄、头孢克洛、头孢羟氨苄、氨苄西林等酶法合成用酶的筛选。具有操作简单、成本低廉、检测准确等特点,适合大规模高通量筛选合成用酶。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/