Bogomolova Elena Grigorevna,Богомолова Елена Григорьевна,Dukhovlinov Ilya Vladimirovich,Духовлинов Илья Владимирович,Dobrovolskaya Olga Andreevna,Добровольская Ольга Андреевна,Fedorova Ekaterina Aleks
申请号：
RU2017127940
公开号：
RU0002649132C1
申请日:
2017.08.03
申请国别(地区):
RU
年份:
2018
代理人:
摘要：
FIELD: medicine.SUBSTANCE: invention relates to medicine and relates to method for preparing active principle of vaccine against Rotavirus infection of FliCVP6VP8 protein, including cultivation of genetic engineering strain Esherihia coli, disintegration of producer cells by action of lysis solution and ultrasound followed by centrifugation, separation of inclusion bodies, their washing and solubilization, refolding of solubilized protein, and chromatographic purification. Lysis is carried out at pH 8.0–8.5, dialysis is performed before solution chromatography, chromatography is carried out first on HiTrap Q Sepharose FF 16/10 anionite, and then on gel filtration column with Superdex S-100 sorbent.EFFECT: invention provides FliCVP6VP8 protein purified from negative impurities.6 cl, 1 tbl, 2 exИзобретение относится к медицине и касается способа получения активного начала вакцины против ротавирусной инфекции белка FliCVP6VP8, включающего в себя культивирование генно-инженерного штамма Esherihia coli, дезинтеграцию клеток-продуцентов воздействием лизирующего раствора и ультразвука с последующим центрифугированием, отделение телец включения, их промывку и солюбилизацию, рефолдинг солюбилизированного белка, и хроматографическую очистку. Лизис проводят при рН 8.0-8.5, перед хроматографией раствора проводят его диализ, хроматографию проводят сначала на анионите HiTrap Q Sepharose FF 16/10, а затем на гель-фильтрационной колонке с сорбентом Superdex S-100. Изобретение обеспечивает получение белка FliCVP6VP8, очищенного от негативных примесей. 5 з.п. ф-лы, 1 табл., 2 пр.
