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一种水牛卵母细胞去核的方法
- 专利权人:
- 广西壮族自治区水牛研究所
- 发明人:
- 杨春艳,尚江华,郑海英,谷毅鹏,黄芬香,李婥,梁贤威,黄锋
- 申请号:
- CN201510445933.6
- 公开号:
- CN105018419A
- 申请日:
- 2015.07.27
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 张涛
- 摘要:
- 本发明提供了一种水牛卵母细胞去核方法,包括以下步骤:1)从屠宰场卵巢获取卵丘卵母细胞复合体,38.5℃、5%CO2、饱和湿度的条件下体外成熟培养22-24h;2)用100μL枪头轻缓吹打成熟培养后的COCs,去除卵丘细胞,剩下卵母细胞;3)挑选含第一极体的MⅡ期卵母细胞,用于去核;4)将水牛卵母细胞转入含有7.5μg/mL细胞松弛素B(CB)的培养液中,38.5℃、5%CO2、饱和湿度的条件下培养30min;5)将处理后的水牛卵母细胞转入覆盖石蜡油的30-40μL去核操作液内;6)在配有纺锤体成像系统的倒置显微镜下去核。采用细胞松弛素B培养卵母细胞,使用纺锤体成像系统观测辅助去核,能够有效提高去核效率。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/