本发明提供了一种森林山蛭抗血栓多肽Sylvestin及其体外表达制备方法,属于多肽合成表达技术领域,所述多肽Sylvsetin的氨基酸序列如Seq ID No.1所示。本发明还提供了所述多肽Sylvestin的改造肽,所述改造肽的氨基酸序列如Seq ID No.5、Seq ID No.6、Seq ID No.7或Seq ID No.8所示。所述多肽Sylvestin及其改造肽具有FXIIa抑制活性,以及抗血栓和治疗中风的功效。本发明所述的体外表达制备方法,实现了山蛭Sylvestin多肽在原核生物体内的规模化、低成本生产,通过纯化应用于生物功能药物的制备。