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分泌抗番茄黄化曲叶病毒单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用
- 专利权人:
- 浙江大学
- 发明人:
- 周雪平,吴建祥,刘欢,谢艳,尚海丽
- 申请号:
- CN201210004197.7
- 公开号:
- CN102559603A
- 申请日:
- 2012.01.09
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 张法高
- 摘要:
- 本发明公开了一种分泌抗番茄黄化曲叶病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单抗的应用。克隆了番茄黄化曲叶病毒上海分离物(TYLCV-SH2)的外壳蛋白基因,利用原核表达系统表达了该病毒的外壳蛋白,用表达纯化的蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,经细胞融合、筛选、克隆,获得1株能稳定传代并分泌抗TYLCV单抗的杂交瘤细胞株D10,其保藏号为CGMCCNo.5538。D10单克隆抗体腹水间接ELISA效价达10-6以上,抗体类型及亚类为IgG1,kappa链。利用D10单抗建立的检测番茄中TYLCV的dot-ELISA检测方法,当病叶1:320倍稀释(w/v,g/mL)时仍能检测到病毒。建立的dot-ELISA和Tissue-blotELISA方法能准确、特异、灵敏地检测田间番茄样品中的TYLCV病毒。抗TYLCV单抗的制备及其检测方法的建立为该番茄病毒病的诊断、预测预报及科学防控提供技术和物质支撑。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/