一种在哺乳动物细胞系中敲除mir-505的方法
- 专利权人:
- 东华大学
- 发明人:
- 邓倩云,周宇荀,常雪莹,王斯佳,肖君华,李凯
- 申请号：
- CN201410478757.1
- 公开号：
- CN104212836A
- 申请日:
- 2014.09.18
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 黄志达
- 摘要：
- 本发明涉及一种在哺乳动物细胞系中敲除mir-505的方法，通过体外合成sgRNA的核苷酸单链，再经过处理得到插入片段，随后将sgRNA利用同源重组或T4连接插入到41824载体中或42230载体中，转化至大肠杆菌的感受态细胞，然后对载体进行菌落PCR检测和测序确认，得到表达载体，通过将PCR产物变性，再退火的方式形成异源杂交双链，利用T7E1酶切试验确定利用CRISPR-Cas9系统对mir-505基因的剪切效率。本发明为如何选择sgRNA表达载体提供参考。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
