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一种单细胞实时荧光定量PCR检测方法及试剂盒
- 专利权人:
- 四川医科大学
- 发明人:
- 毛亮,杨艳,曾博,黄文俊,李涛,文静,黄鹂,谭晓秋,兰欢,曾晓荣
- 申请号:
- CN201510390947.2
- 公开号:
- CN104911274A
- 申请日:
- 2015.07.06
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 刘雪莲`王芸
- 摘要:
- 本发明公开了一种单细胞实时荧光定量PCR检测方法。该检测方法包括以下步骤:(1)单细胞捕获;(2)cDNA的合成;(3)用SYBRGreen染料法对基因表达水平定量检测。该检测方法采用膜片钳技术中的玻璃微管电极,在倒置相差显微镜下,根据毛细现象原理捕获单个细胞,然后采用Oligo(dT)20引物,以mRNA为模板反转录合成cDNA,对表达丰度极低的基因可采用多次退火环状循环扩增技术进行cDNA扩增复制,最后再进行实时荧光定量PCR检测。本发明所述检测方法误差小、准确度和灵敏度高,适用于急性酶分离的哺乳动物细胞、原代培养的细胞、传代培养的成熟细胞系等多种细胞。本发明还提供一种单细胞实时荧光定量PCR试剂盒。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/