筛选超低岩藻糖细胞系的方法和应用
- 专利权人:
- 北京康明生物药业有限公司
- 发明人:
- 朱晓东,张海涛
- 申请号:
- CN201610194325.7
- 公开号:
- CN106167525A
- 申请日:
- 2016.04.01
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 摘要:
- 筛选超低岩藻糖细胞系的方法和应用,本发明提供了构建表达抗体和IgG‑Fc融合蛋白岩藻糖缺陷型的宿主细胞方法及抗体和IgG‑Fc融合蛋白岩藻糖活性的检测方法,及此类细胞株的具体应用。本发明通过TALEN(和/或CRISPR)技术高效敲除生产抗体或IgG‑Fc融合蛋白工程细胞中的岩藻糖基转移酶(FUT8)基因的表达来实现,通过小扁豆凝集素(LCA)加压、基因测序、流式细胞仪筛选方法,获得岩藻糖高效敲除的宿主细胞。并将岩藻糖缺陷的CHOK1宿主细胞株构建成表达抗体蛋白的稳定工程细胞株,获得抗体蛋白后进行糖型分析,结果表明岩藻糖敲除效率达99%以上。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心