本发明公开了一种表达鹅细小病毒VP3基因的重组新城疫病毒及其构建方法,属于重组病毒疫苗领域。该重组新城疫病毒为鹅源分离株,其F蛋白的裂解位点氨基酸是GRQGRL,P3基因位于新城疫病毒P基因和M基因之间非编码区。将转录质粒pCI‑NA‑VP3(SEQ ID NO.1)和转录辅助质粒pcDNA‑N、pcDNA‑P、pcDNA‑L(SEQ ID NO.2~4)共转染新城疫病毒复制许可的宿主细胞,培养转染后的宿主细胞,从转染的宿主细胞的细胞悬液中可拯救重组新城疫病毒。本发明的表达鹅细小病毒VP3基因的重组新城疫病毒可作为预防新城疫、鹅细小病毒二联活载体疫苗。