本发明公开了一种检测玉米素的电化学生物传感器及其制备方法,所述电化学生物传感器,包括:电极,依次修饰在电极表面的纳米金、探针DNA、适配体DNA、辅助DNA、亲和素修饰的碱性磷酸酯酶;所述探针DNA、适配体DNA、辅助DNA的序列分别如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.3所示。本发明利用纳米金良好的生物兼容性和导电性,以及碱性磷酸酯酶专一性的催化性质,实现电信号的扩增,提高玉米素的检测灵敏度。利用核酸适配体对玉米素的特异结合和识别作用,提高玉米素检测的特异性。本发明的检测方法简单,实现了仪器小型化,且易于操作,仅对玻碳电极表面进行简单的处理,即可实现对玉米素的检测。