本发明公开了一种用于溶菌酶检测的双输出传感器及其制备方法和应用,其制备过程包括(1)制备3-叠氮-7羟基香豆素;(2)将1.0 mM丙炔胺与1.0 mM 3-叠氮-7羟基香豆素混合后,再加入0.1 mM CuSO4与0.5 mM抗坏血酸钠,室温培育10分钟,发生点击化学反应,生成三唑香豆素化合物;(3)制备直径为13 nm的金纳米粒子溶液;(4)将10 uM三唑香豆素化合物和100 uL金纳米粒子溶液在pH为7.5的10 mM 3-(N-吗啉基)丙磺酸缓冲溶液中混合2分钟,再加入0.25 mM聚乙烯吡咯烷酮。用肉眼观察到该传感器对溶菌酶检测的最低浓度为50 ng/mL,已成功应用于市场上鸡蛋蛋清液中溶菌酶含量的检测。本发明具有操作简单、成本低、灵敏度高、特异性好等优点。