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一种重组EBV gHgL免疫原的制备方法及其应用
- 专利权人:
- 新乡医学院
- 发明人:
- 段良伟,王辉,郑前前,牛玉娜,牛志国,张佳璐,刘梦楠
- 申请号:
- CN202010026943.7
- 公开号:
- CN111154803A
- 申请日:
- 2020.10.01
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2020
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明属于生物医药技术领域,尤其涉及一种重组EBV gHgL免疫原的制备方法及其应用。本发明利用聚合酶链式反应PCR技术,获得gH和gL的基因片段,将这两个目的片段分别克隆入昆虫表达载体pMT,经质粒大提去除内毒素后,与抗性筛选质粒pCoBlast一起共转染黑腹果蝇Schneider2细胞,用杀稻瘟菌素进行阳性克隆筛选,筛选出高效分泌表达gHgL的S2稳定细胞系。扩大培养后,经镍柱亲和层析和凝胶过滤层析两步纯化,即可获得高均一、高产量、高天然保真性的gHgL。通过微量热涌动技术验证了gHgL与受体EphA2的相互作用,适合作为免疫原用于EBV亚单位疫苗以及与gB和gp350联合疫苗的研发。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/