本发明公开了一种用于快速鉴定十字花科蔬菜根肿病的引物及鉴定方法。利用微量法快速提取病根的总DNA,随后,利用SEQ ID NO.1所示序列的上游引物和SEQ ID NO.2所示序列的下游引物对总DNA的ITS序列进行扩增,若扩增出286bp的核糖体DNA片段——PbrDNA‑286,则鉴定为患有根肿病的植株。该方法可在一个工作日内完成所有检测过程。利用ECD系统对不同芸薹根肿菌生理小种进行鉴定并开展分子检测,结果验证了上述鉴定方法的准确性。本发明为快速鉴定十字花科蔬菜根肿病提供了一种简便可靠的方法,本发明对十字花科作物根肿病的防治实践与理论研究均有重要意义。