STEVEN J BLAISDELL,ブライスデル，ステイーブン・ジエイ,COLLETTE M CUTLER,カトラー，コレツト・エム,BRITTANY C PAPORELLO,パポレロ，ブリタニー・シー,ALEXANDRE AMBROGELLY,アムブロゲリイ，アレクサンドレ
申请号：
JP2018107216
公开号：
JP2018168160A
申请日:
2018.06.04
申请国别(地区):
JP
年份:
2018
代理人:
摘要：
PROBLEM TO BE SOLVED: To provide interleukin (IL)-10 having a relatively short half life, and in particular a method of producing, more efficiently with greater production yields, a mixture of mono- and di-PEG (polyethylene glycol)-ylated interleukin (IL)-10 to provide a longer half life and higher biological activity.SOLUTION: A method of producing a mixture of mono- and di-PEGylated IL-10 in which a PEG molecule is covalently attached to an amino acid residue of a subunit of IL-10 comprises: reacting IL-10 with an activated PEG-linker, such as PEG-propylaldehyde or succinimidylcarbonate-PEG, in the presence of a boron reducing agent, such as sodium cyanoborohydride, to produce a mixture of mono-PEGylated IL-10 and di-PEGylated IL-10, where the IL-10 and the reducing agent are present in a molar ratio of 0.0009 to 0.04. The production method may further comprise a purification step using size exclusion chromatography or the like.SELECTED DRAWING: Figure 1COPYRIGHT: (C)2019,JPO&INPIT【課題】比較的短い半減期を有するインターロイキン（ＩＬ）１０に関し、より長い半減期とより高い生物活性を得るために、モノ－及びジ－ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）化インターロイキン（ＩＬ）１０の混合物を、より高い製造収率で、より効率的に製造する方法の提供。【解決手段】ＰＥＧ分子がＩＬ１０のサブユニットのアミノ酸残基に共有結合したモノ－及びジ－ＰＥＧ化ＩＬ１０の混合物の製造方法であって、ＩＬ－１０を、ナトリウムシアノボロヒドリド等のホウ素還元剤の存在下、ＰＥＧ－プロピルアルデヒド、スクシンイミジルカルボナート－ＰＥＧ等の活性化ＰＥＧ－リンカーと反応させ、モノ－ＰＥＧ化ＩＬ－１０及びジ－ＰＥＧ化ＩＬ－１０の混合物を製造する工程を含み、前記ＩＬ－１０及び還元剤が０．０００９～０．０４のモル比で存在する前記製造方法。前記製造方法は、更にサイズ排除クロマトグラフィー等を用いる精製工程を含んでよい。【選択図】図１
