本发明公开了一种嵌合抗原受体及其基因和重组表达载体、工程化CD19靶向性的NKT细胞及其应用,所述嵌合抗原受体为CD19ScFv-2-CD8-CD137-CD3ζ,由CD19ScFv-2、CD8的铰链区和跨膜区、CD137的胞内信号结构域和CD3ζ的胞内信号结构域串联构成,编码所述CD19ScFv-2的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示。采用本发明的嵌合抗原受体CD19ScFv-2-CD8-CD137-CD3ζ修饰的NKT细胞治疗进展期CD19阳性的急性B淋巴细胞白血病时,对白血病细胞具有一定的特异杀伤活性。