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一种对乙型肝炎病毒易感的人胎肝细胞分离、冻存与复苏的方法及应用
- 专利权人:
- 康珞生物科技(武汉)有限公司
- 发明人:
- 胡康洪,周明,祁燕,李家福,成细瑶
- 申请号:
- CN201410009255.4
- 公开号:
- CN103740637A
- 申请日:
- 2014.01.09
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2014
- 代理人:
- 王敏锋
- 摘要:
- 本发明公开了一种对乙型肝炎病毒易感的人胎肝细胞分离、冻存与复苏的方法及应用,步骤为:将新鲜的肝组织经暴露的血管用灌注溶液冲洗干净,直至消化完全;然后将新鲜分离的肝细胞置于含有细胞洗液的培养皿中过细胞筛得到单细胞悬液;清洗后沉淀单细胞并重悬,用渐进冻存的方法,保存于液氮;复苏的胎肝细胞通过优化高活力胎肝细胞的铺板密度、Percoll离心介质纯化低活力胎肝细胞以及后续培养程序,建立紧密的细胞单层培养。本发明可大量分离、保存及高效率复苏胎肝细胞,复苏的胎肝细胞能保持良好的肝细胞特性、分化状态及对乙型肝炎病毒易感性,从而缓解原代肝细胞资源稀缺问题,并建立了稳定的体外抗乙型肝炎病毒筛药平台。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/