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长链金属硫蛋白基因MTT1的优化及植物表达载体构建
- 专利权人:
- 王清路
- 发明人:
- 王清路,张杰,周彩霞,刘悦,窦烨
- 申请号：
- CN201410544335.X
- 公开号：
- CN104342451A
- 申请日:
- 2014.10.15
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明公开了一种经密码子优化的嗜热四膜虫金属硫蛋白MTT1植物表达载体及其应用。该载体按照如下步骤的方法得到：在不改变氨基酸序列的前提下，按照芦苇偏爱密码子对嗜热四膜虫金属硫蛋白MTT1进行优化设计，综合考虑密码子使用频率，GC含量及mRNA二级结构等影响因素，使其利于在芦苇、烟草等植物中高效表达，并在基因序列两端预留NcoI和EcoRI酶切位点。然后用NcoI和EcoRI双酶切植物表达载体pCAMBIA-1302和金属硫蛋白基因MTT1两端NcoI和EcoRI酶切位点，回收植物表达载体片段和金属硫蛋白基因片段，经DNAT4连接酶将二者连接成金属硫蛋白植物表达载体。经将表达载体pCAMBIA-1302-MTT1转化农杆菌侵染烟草组培证实，原生生物金属硫蛋白可以在植物中表达。该载体还可以借助根瘤农杆菌转化芦苇及其他植物，获得具有清
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
