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在Pichia pastoris中组成型表达靶向抗菌肽AgPlectasin的方法
- 专利权人:
- 中国农业科学院饲料研究所
- 发明人:
- 王建华,毛若雨,滕达,王秀敏,张勇
- 申请号：
- CN201310244824.9
- 公开号：
- CN103320461A
- 申请日:
- 2013.06.19
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2013
- 代理人:
- 王朋飞
- 摘要：
- 本发明提供了一种利用GAP启动子在毕赤酵母中组成型表达靶向抗菌肽AgPlectasin的方法。本发明利用GAP启动子替换载体pPICAgPlectasin中的AOX启动子，构建组成型重组表达载体pGAPAgPlectasin并转化毕赤酵母X-33，获得的重组酵母经发酵培养，能够分泌产生AgPlectasin。本发明首次实现靶向抗菌肽AgPlectasin在毕赤酵母中组成型表达，经120小时培养后发酵液中总蛋白浓度达到532.4mg/L；发酵液上清经G25脱盐和SP离子交换层析后能够得到目标产物纯品，产量为118.37mg/L；经Genetools分析其纯度为93.27%。抑菌实验表明AgPlectasin对金黄色葡萄球菌ATCC标准菌株有很强抑制作用，AgPlectasin的MIC介于0.09-1.47μM。本发明所述方法获得的AgPlectasin可应用于抗菌药物、食品添加剂、化妆品、饲料添加剂等领域，具有广阔的应用价值和市场前景。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
