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一种过量表达PBD-2基因的转基因猪的培育方法
- 专利权人:
- 华中农业大学
- 发明人:
- 周锐,杨希
- 申请号：
- CN201110453326.6
- 公开号：
- CN102517329A
- 申请日:
- 2011.12.30
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 王敏锋
- 摘要：
- 本发明公开了一种用于过量表达猪PBD-2基因的转基因猪的培育方法，其步骤：①pcDNA3.1(+)/pCA-PBD2载体构建与线性化：设计引物，提取猪的肝脏组织RNA，进行RT-PCR扩增获得PBD-2基因，乙醇沉淀，用灭菌水溶解；②脂质体转染及细胞筛选：构建过量表达PBD-2的猪成纤维细胞；③手工克隆方法获取重组囊胚；④胚胎移植：将培育好的囊胚移入代孕母猪的输卵管中；⑤转基因猪的鉴定。方法易行，操作简便。克隆猪PBD-2基因后，将其插入到表达载体中通过细胞转染筛选出过表达猪PBD-2的猪成纤维细胞；过表达PBD-2的猪成纤维细胞进行手工核移植于猪卵母细胞而获得重构囊胚，将阳性囊胚移植入受体母猪输卵管中，获得过表达PBD-2基因的转基因猪。具有潜在广泛抗菌能力，为抗病育种研究提供良好素材。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
