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一种过量表达PBD-2基因的转基因猪的培育方法
专利权人:
华中农业大学
发明人:
周锐,杨希
申请号:
CN201110453326.6
公开号:
CN102517329A
申请日:
2011.12.30
申请国别(地区):
中国
年份:
2012
代理人:
王敏锋
摘要:
本发明公开了一种用于过量表达猪PBD-2基因的转基因猪的培育方法,其步骤:①pcDNA3.1(+)/pCA-PBD2载体构建与线性化:设计引物,提取猪的肝脏组织RNA,进行RT-PCR扩增获得PBD-2基因,乙醇沉淀,用灭菌水溶解;②脂质体转染及细胞筛选:构建过量表达PBD-2的猪成纤维细胞;③手工克隆方法获取重组囊胚;④胚胎移植:将培育好的囊胚移入代孕母猪的输卵管中;⑤转基因猪的鉴定。方法易行,操作简便。克隆猪PBD-2基因后,将其插入到表达载体中通过细胞转染筛选出过表达猪PBD-2的猪成纤维细胞;过表达PBD-2的猪成纤维细胞进行手工核移植于猪卵母细胞而获得重构囊胚,将阳性囊胚移植入受体母猪输卵管中,获得过表达PBD-2基因的转基因猪。具有潜在广泛抗菌能力,为抗病育种研究提供良好素材。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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