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大鲵虹彩病毒主衣壳蛋白的原核表达及多抗制备和应用
- 专利权人:
- 中国水产科学研究院长江水产研究所
- 发明人:
- 曾令兵,高正勇,张辉,周勇,孟彦
- 申请号：
- CN201210130004.2
- 公开号：
- CN102643835A
- 申请日:
- 2012.04.28
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 王敏锋
- 摘要：
- 本发明公开了一种大鲵虹彩病毒主衣壳蛋白的原核表达及多抗制备和应用，其步骤是：1)根据GSIV-MCP基因序列，设计引物；2)用EPC细胞培养GSIV，抽提病毒核酸为模板，PCR扩增；3)将纯化的PCR产物插入到PET-32(a)，得到重组表达载体；4)重组表达载体转化大肠杆菌感受态细胞，得到重组菌株；5)使用不同IPTG浓度及不同的诱导时间诱导重组菌株，获得最佳诱导条件；6)经过诱导的重组菌株经超声波破碎处理，经蛋白纯化试剂盒纯化，得到纯化的重组蛋白；7)纯化后的重组蛋白采用皮下多点注射法免疫新西兰大白兔，制备多克隆抗体。该多克隆抗体经ELISA效价检测，具有滴度高，特异性强。为GSIV的快速检测试剂盒及大鲵病毒性出血病的防治奠定基础。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
