一种建立CYP2C11基因敲除大鼠模型的方法
- 专利权人:
- 江苏大学
- 发明人:
- 魏渊,张晓燕,许海淼
- 申请号:
- CN201510980737.9
- 公开号:
- CN105624196A
- 申请日:
- 2015.12.24
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2016
- 代理人:
- 摘要:
- 本发明涉及一种建立CYP2C11基因敲除大鼠模型的方法,属于转基因技术领域;本发明首先确定待敲除基因的靶位点并设计合成其引物序列;插入经酶切好的Cas9-gRNA-Bsal载体中,扩增得到带有T7启动子序列的靶位点sgRNA;体外转录并纯化后检测其活性;将有活性的sgRNA和Cas9 RNA显微注射入大鼠单细胞胚,获得Founder大鼠;筛选出CYP2C11基因敲除大鼠杂合子后交配得到纯合子个体,即CYP2C11基因敲除大鼠;本发明提供全新的用P450基因敲除大鼠模型代替小鼠模型的制备方法,使基因敲除技术真正融入药物的非临床安全评价,有利于候选药物的早期毒性的发现。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心