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高效裂解大肠杆菌的裂菌制剂及其裂解方法、用途
- 专利权人:
- 上海交通大学
- 发明人:
- 严亚贤,孙建和,杨曦
- 申请号：
- CN201210162640.3
- 公开号：
- CN102703491A
- 申请日:
- 2012.05.23
- 申请国别(地区):
- CN
- 年份:
- 2012
- 代理人:
- 摘要：
- 本发明公开了一种高效裂解大肠杆菌的裂菌制剂及其裂解方法、用途。设计引物，采用PCR扩增溶原性大肠杆菌中诱导的裂解性噬菌体的裂解酶基因，获得目的片段，再将目的片段与pET-28a（+）载体连接，得到重组表达质粒，导入大肠杆菌BL21（DE3）表达，获得阳性转化子，通过诱导，表达重组的融合蛋白，纯化诱导得纯化的重组蛋白，筛选具有裂解活性的重组表达蛋白，即得所述裂菌制剂。所述裂解方法为pH 8.0，37℃，采用的还原剂为质量百分比浓度为0.8%的β-巯基乙醇或10mM的半胱氨酸，缓冲液为20mM pH5.2醋酸钠缓冲液。本发明获得的裂菌制剂对多种血清型大肠杆菌的裂解特异性强、裂解效率高，可有效杀灭大肠杆菌。
- 来源网站：
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址：
- http://www.ckcest.cn/home/
