一种鸡成骨细胞体外分离培养方法
- 专利权人:
- 武汉轻工大学
- 发明人:
- 郭双双,李叶涵,丁斌鹰,侯永清,易丹
- 申请号:
- CN201711161552.0
- 公开号:
- CN107699542A
- 申请日:
- 2017.11.21
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2018
- 代理人:
- 高爽
- 摘要:
- 本发明属于生物技术领域,涉及一种鸡成骨细胞体外分离培养方法。该方法包括以下步骤:(1)选用种蛋,无菌条件下取鸡胚的颅骨;(2)将颅骨置于胰蛋白酶溶液中孵育;(3)将颅骨剪成组织块,加入II型胶原酶溶液孵育;(4)用含有胎牛血清的培养基终止消化,取消化液;(5)将消化液离心弃去上清液,用含有胎牛血清、青霉素和链霉素的培养基重悬沉淀物,混匀后移入细胞培养瓶中;(6)采用差速贴壁的方法去除成纤维细胞,将未贴壁的细胞悬液转移至另一细胞培养瓶中培养;(7)定期更换培养液,待原代成骨细胞长满,用胰蛋白酶消化,差速贴壁纯化后传代。本发明的方法操作简便、细胞得率和纯度高。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心