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在酵母系统高密度发酵生产重组蚯蚓纤溶酶PI239的方法以及工程菌
专利权人:
中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
发明人:
梁国栋,付士红,葛涛
申请号:
CN200510115661.X
公开号:
CN1962862B
申请日:
2005.11.09
申请国别(地区):
中国
年份:
2012
代理人:
郭佩兰
摘要:
一种在酵母系统高密度发酵生产重组蚯蚓纤溶酶PI239的方法以及工程菌,方法包括:通过化学合成方法或应用PCR技术扩增DNA/RDA方法获得蚯蚓纤溶酶PI239的DNA序列;含有目的基因的分泌性酵母表达重组质粒的构建;线性化重组质粒电穿孔转化感受态酵母细胞;双层滤膜法筛选高表达株,并放大培养;PI239蛋白在酵母中以α-factor信号肽蛋白引导的分泌表达;以高活性克隆株为种子菌进行高密度发酵生产重组蚯蚓纤溶酶PI239及纯化。工程菌为pPICPI239/KM71-48,保藏号为:CGMCCNo1515。优点:本发明克隆到蚯蚓纤溶酶PI239基因,并成功地进行了表达,为今后开发研究基因工程产品创造了良好的条件,且本发明的蚯蚓纤浴酶PI239为治疗血栓栓塞性疾病等药物提供新的蛋白。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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