本发明涉及基因工程,具体涉及一种全人源抗人CD40单克隆抗体,所述单克隆抗体的轻链可变区和重链可变区分别为:B52:SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3,或B56:SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5,或D20:SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7,或D24:SEQ ID NO:8和SEQ ID NO:9,或D45:SEQ ID NO:10和SEQ ID NO:11所示氨基酸或与其具有至少80%序列同一性的同源序列,所述全人源抗人CD40单抗能特异性地与人CD40结合。本发明的全人源抗人CD40单克隆抗体具有高生物学激动剂活性的全人源抗CD40特异性单克隆抗体。所述抗体针对CD40阳性肿瘤细胞直接发挥作用,还能够通过调节适应性和固有免疫系统增强机体对肿瘤细胞应答。