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一种载体蛋白与多糖共价键连接成结合物的方法及应用
专利权人:
发明人:
赵娜,刘苏艳
申请号:
CN202211198510.5
公开号:
CN115671274A
申请日:
2022.09.29
申请国别(地区):
CN
年份:
2023
代理人:
摘要:
本发明提供了一种多糖与载体蛋白共价键连接形成结合物的方法。该法以1‑氰基‑4‑二甲基铵吡啶四氟硼酸盐作活化剂,得到活化多糖氰酸酯。以胱胺为连接物,将胱胺一端的氨基与活化多糖上的氰酯基团反应,同多糖共价键连接,生成硫醇化多糖。以3(2‑氯乙基)磷酸酯还原硫醇化多糖中的胱胺二硫键,生成带游离巯基的硫醇化多糖。用赖氨酸猝灭未反应的氰酯。将反应产物透析,得纯化硫醇化多糖。现有的多糖蛋白结合疫苗中的荚膜多糖都可溶于氯化钠溶液或缓冲液中,相继通过CDAP活化和硫醇化后,与活化蛋白反应形成多糖蛋白结合物。含有游离巯基的硫醇化多糖溶液与溴乙酰化蛋白溶液混合后,再脱溴化氢,多糖与蛋白间以硫醚共价键连接,得稳定性好的结合物。
来源网站:
中国工程科技知识中心
来源网址:
http://www.ckcest.cn/home/

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