The present invention comprises the steps of treating the stem cells AA (activin A) to obtain differentiated endoderm cells from the stem cells; Treating the obtained endoderm cells with RA (retinoic acid) to obtain hepatocytes differentiated from the endoderm cells, and treating the obtained hepatoblasts with NA (nicotinamide) to proliferate the hepatocytes; And, it relates to a method of differentiation of high functional hepatocytes comprising the step of obtaining hepatocytes differentiated from the hepatocytes by treating the proliferated hepatocytes HGF (hepatocyte growth factor).본 발명은 줄기세포에 AA(activin A)를 처리하여 상기 줄기세포로부터 분화된 내배엽세포를 수득하는 단계; 상기 수득한 내배엽세포에 RA(retinoic acid)를 처리하여 상기 내배엽세포로부터 분화된 간모세포를 수득하고, 상기 수득한 간모세포에 NA(nicotinamide)를 처리하여 간모세포를 증식시키는 단계; 및, 상기 증식된 간모세포에 HGF(hepatocyte growth factor)를 처리하여 상기 간모세포로부터 분화된 간세포를 수득하는 단계를 포함하는 고기능성 간세포의 분화방법에 관한 것이다.