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一种捕食线虫真菌重组胞外丝氨酸蛋白酶的制备方法
- 专利权人:
- 石河子大学
- 发明人:
- 孟庆玲,乔军,王俊伟,王为升,张再超,蔡扩军,杨丽红,陈创夫,赵春光
- 申请号:
- CN201310021164.8
- 公开号:
- CN103103172B
- 申请日:
- 2013.01.21
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2015
- 代理人:
- 朱永慧
- 摘要:
- 本发明涉及一种捕食线虫真菌重组胞外丝氨酸蛋白酶的制备方法,属生物技术领域。主要包括以下步骤:根据胞外丝氨酸蛋白酶XAoz1基因序列,设计特异性引物并扩增目的片段;将扩增的目的片段PCR产物与载体pMD19-T连接构建重组载体pMD-XAoz1;用限制性内切酶SnaBⅠ和NotⅠ分别双酶切重组载体pMD-XAoz1与表达载体pPIC9K,回收的产物通过T4连接酶连接构建重组穿梭载体pPIC9K-XAoz1;将上述穿梭载体电转化进入表达宿主毕赤酵母菌Pichia pastoris GS115感受态细胞等。其经济实用、表达高效,可为筛选自然高毒力的菌株或转基因构建遗传改良的抗性菌物奠定基础。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/