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甘蔗花叶病和宿根矮化病病原的多重PCR检测方法
- 专利权人:
- 中国热带农业科学院热带生物技术研究所
- 发明人:
- 杨本鹏,张显勇,张树珍,蔡文伟
- 申请号:
- CN200710193814.1
- 公开号:
- CN101186948A
- 申请日:
- 2007.11.23
- 申请国别(地区):
- 中国
- 年份:
- 2008
- 代理人:
- 莫臻
- 摘要:
- 本发明公开了一种甘蔗花叶病和宿根矮化病病原的多重PCR检测方法,其特征是:(1)取甘蔗植株茎基部带鞘叶片为检测样品;(2)设计反转录引物和PCR检测引物对:cpc1、cpc2,RSD引物对F1、F2;对甘蔗花叶病毒和甘蔗宿根矮化病病原的基因片段进行扩增;(3)提取总核酸,将其中的RNA反转录成cDNA;(4)设计该一步法多重RT-PCR的反应体系和扩增程序,将核酸进行扩增;(5)利用凝胶电泳分析扩增结果及特异性,同时利用十倍递进稀释法检测该一步法多重RT-PCR的敏感度。本发明所提供的检测方法通过提取甘蔗的总核酸,在同一个PCR管中完成反转录及PCR反应就可以同时检测出这两种病害的病原,具有操作简单、节省时间、成本低、特异性和敏感性高等优点。
- 来源网站:
- 中国工程科技知识中心
- 来源网址:
- http://www.ckcest.cn/home/