非洲猪瘟病毒环介导等温扩增诊断方法的建立

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作   者：

王华;  王君玮;  徐天刚;  张维;  任炜杰;  王志亮; 

作者机构：

中国动物卫生与流行病学中心国家外来动物疫病诊断中心ABSL-3实验室; 

关键词：

诊断;  非洲猪瘟病毒;  环介导等温扩增反应; 

期刊名称：

中国兽医科学

i s s n：

1673-4696

年卷期：

2010 年 40 卷 09 期

页   码：

940-944

摘   要：

通过对GenBank中登录的非洲猪瘟病毒(ASFV)p72蛋白基因序列进行分析,根据p72保守区序列设计合成了内(FIP,BIP)、外(F3,B3)2对引物,其中外引物扩增片段的大小为184bp。通过对反应条件进行优化,建立了非洲猪瘟LAMP检测方法。结果显示,该方法在62℃保温60min即可完成,最低可检测到1×101 copies/μL的病毒DNA,与常规PCR方法相比灵敏度高100倍。对ASFV、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒基因组DNA同时检测,结果仅有ASFV出现条带,而其他均未出现目的条带。表明,建立的ASFV-LAMP诊断方法具有较好的特异性和敏感性。