鸭疫里默氏杆菌16S rRNA和dnaB基因的双重PCR检测方法的建立

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作   者：

丁云竹;  孙冰清;  姜盼;  崔俊生;  陶敏捷;  胡青海;  常维山; 

作者机构：

山东农业大学动物科技学院;  中国农业科学院上海兽医研究所; 

关键词：

鸭疫里默氏杆菌;  鉴定;  检测;  双重PCR; 

期刊名称：

中国预防兽医学报

基金项目：

应用抑制性消减杂交和信号标签诱变技术筛选鸭疫里默氏杆菌的毒力基因
溶血素在鸭疫里默氏杆菌HXb2株获铁和致病过程中的作用

i s s n：

1008-0589

年卷期：

2017 年 39 卷 01 期

页   码：

50-53

摘   要：

为了快速、准确地鉴定鸭疫里默氏杆菌(RA),本实验根据RACH3株16SrRNA和dnaB基因序列设计引物,经引物筛选和PCR反应条件优化后,建立了检测RA的双重PCR方法。结果表明该方法对检测的所有不同血清型RA菌株均能扩增出364bp和627bp两条特异的目的片段,而对鸭致病性大肠杆菌、鸭源禽巴氏杆菌、肠炎沙门氏菌、黄杆菌等对照菌株的扩增结果均为阴性;该PCR方法对细菌HXb2基因组DNA和菌液的检测敏感性分别为17.33ng/mLDNA和2.9×10~3cfu/mL细菌。利用建立的双重PCR检测了RA感染鸭的肝脏和脑组织中的RA,结果显示该方法与细菌分离法符合率分别为100%(9/9)和77.8%(7/9),表明本实验建立的双重PCR方法可用于检测肝脏组织中RA。本研究建立的双重PCR方法既可以对分离的RA疑似菌株进行快速检测和鉴定,也可以直接用于临床样品中RA的检测。